5—羥甲(jia)(jia)基糠醛(quan)(quan)（5—Hydroxymethyl furfural，簡稱5—HMF）是葡(pu)萄糖(tang)等單糖(tang)化(hua)合物在(zai)高溫(wen)(wen)或(huo)弱酸(suan)等條件下脫水產(chan)生的一(yi)個醛(quan)(quan)類化(hua)合物。該(gai)化(hua)合物穩定性不好，容(rong)易分解成(cheng)(cheng)乙酰丙(bing)酸(suan)和(he)甲(jia)(jia)酸(suan)，或(huo)發(fa)生聚合反應。一(yi)方(fang)(fang)面(mian)，5—HMF對人體橫紋肌和(he)內(nei)臟(zang)有損害；另一(yi)方(fang)(fang)面(mian)，葡(pu)萄糖(tang)注射(she)液(ye)在(zai)高溫(wen)(wen)情(qing)況(kuang)下顏色(se)容(rong)易變黃(huang)，雖(sui)然(ran)5—HMF本身無色(se)，但由(you)(you)于5—HMF可發(fa)生聚合而由(you)(you)聚合物導致變色(se)，且(qie)葡(pu)萄糖(tang)注射(she)液(ye)顏色(se)的深淺與5—HMF產(chan)生量成(cheng)(cheng)正比。

    　5—HMF的(de)量可(ke)指(zhi)代產品中葡萄(tao)糖的(de)分解程度，葡萄(tao)糖有α—葡萄(tao)糖和β—葡萄(tao)糖兩個異構(gou)(gou)體，它們與鏈式(shi)結(jie)構(gou)(gou)A存在平(ping)衡(heng)，通過鏈式(shi)結(jie)構(gou)(gou)A可(ke)生(sheng)(sheng)成大量的(de)四氫呋(fu)喃類物質。經過脫(tuo)水反應后生(sheng)(sheng)成 5—羥(qian)甲(jia)基(ji)糠(kang)(kang)(kang)醛(quan)(quan)， 5—羥(qian)甲(jia)基(ji)糠(kang)(kang)(kang)醛(quan)(quan)受(shou)熱后再生(sheng)(sheng)成 5—甲(jia)基(ji)糠(kang)(kang)(kang)醛(quan)(quan)、糠(kang)(kang)(kang)醛(quan)(quan)和其它呋(fu)喃類物質。因此，糠(kang)(kang)(kang)醛(quan)(quan)、 5—甲(jia)基(ji)糠(kang)(kang)(kang)醛(quan)(quan)和 5—羥(qian)甲(jia)基(ji)糠(kang)(kang)(kang)醛(quan)(quan)是(shi)葡萄(tao)糖 主要裂解產物。5—羥(qian)甲(jia)基(ji)糠(kang)(kang)(kang)醛(quan)(quan)含量指(zhi)標控(kong)制為(wei)小(xiao)于300ppm。

    　1 試劑

    　乙酸乙酯、乙腈 、乙酸、乙酸鹽緩沖液、標準品：5—羥甲基糠醛純度＞99%、5—羥甲基糠醛標準儲備液、5—羥甲基糠醛標準工作液。
    　1.1 冰醋酸（分析純）；
    　1.2 乙酸乙酯（分析純）；
    　1.3 乙腈：色譜純  一級品  含量>99.9%；
    　1.4 醋酸溶液：c（CH3COOH）=0.2mol/L；
      1.5 醋酸鈉溶液：c（CH3COONa）=0.2mol/L；
    　1.6 醋酸鹽緩沖溶液（pH=4.00）：醋酸水溶液：醋酸鈉水溶液=164：36（v/v）；
    　無水碳(tan)酸鈉溶液：c（Na2CO3）=14g/L。

圖譜1

峰參數1

圖譜2

峰參數2

    　2 檢驗步(bu)驟

    　2 .1試樣溶(rong)液的制備：

　　稱取(qu)試(shi)樣(yang)4. 8g―5. 2g，置(zhi)于(yu)125ml的心(xin)形(xing)瓶(ping)中(zhong)(zhong)，用(yong)約25ml蒸餾水(shui)(shui)稀釋，然后(hou)加入30ml乙(yi)(yi)酸(suan)(suan)(suan)乙(yi)(yi)酯振(zhen)蕩5min，靜置(zhi)分(fen)層(ceng)。將水(shui)(shui)層(ceng)放入另(ling)一(yi)(yi)個心(xin)形(xing)瓶(ping)中(zhong)(zhong)，用(yong)30ml乙(yi)(yi)酸(suan)(suan)(suan)乙(yi)(yi)酯重復萃(cui)取(qu)兩次(ci)，棄去水(shui)(shui)層(ceng)，合并(bing)(bing)(bing)三次(ci)乙(yi)(yi)酸(suan)(suan)(suan)乙(yi)(yi)酯萃(cui)取(qu)液(ye)(ye)于(yu)另(ling)一(yi)(yi)心(xin)形(xing)瓶(ping)中(zhong)(zhong)，再加入10ml碳(tan)酸(suan)(suan)(suan)鈉水(shui)(shui)溶(rong)(rong)液(ye)(ye)立即振(zhen)蕩，靜置(zhi)分(fen)層(ceng)（此(ci)凈化操作應(ying)在論文源QQ華夏酒(jiu)報2min內(nei)完成）。再用(yong)20ml乙(yi)(yi)酸(suan)(suan)(suan)乙(yi)(yi)酯提取(qu)碳(tan)酸(suan)(suan)(suan)鈉水(shui)(shui)層(ceng)一(yi)(yi)次(ci)。棄去碳(tan)酸(suan)(suan)(suan)鈉水(shui)(shui)層(ceng)，合并(bing)(bing)(bing)乙(yi)(yi)酸(suan)(suan)(suan)乙(yi)(yi)酯提取(qu)液(ye)(ye)，并(bing)(bing)(bing)加入9滴冰(bing)醋酸(suan)(suan)(suan)，全部轉移至旋轉蒸發器(qi)(qi)內(nei)，于(yu)40℃―45℃下(xia)，蒸至剩余溶(rong)(rong)液(ye)(ye)約為(wei)1ml―2ml時(shi)，卸下(xia)心(xin)形(xing)瓶(ping)，在40℃下(xia)用(yong)氮氣吹干，用(yong)1ml醋酸(suan)(suan)(suan)鹽緩(huan)沖溶(rong)(rong)液(ye)(ye)溶(rong)(rong)解殘留物，用(yong)帶有0.45μm水(shui)(shui)系濾膜的針頭式(shi)過濾器(qi)(qi)濾入樣(yang)品(pin)瓶(ping)，作為(wei)試(shi)樣(yang)溶(rong)(rong)液(ye)(ye)。如果試(shi)樣(yang)溶(rong)(rong)液(ye)(ye)不能及時(shi)測試(shi)時(shi)，應(ying)先存放在冰(bing)箱(xiang)中(zhong)(zhong)冷藏(zang)，但不得超(chao)過48小時(shi)。

    　2 .2  5—羥甲基糠醛標準儲備液配制：
　　稱取10mg的(de)羥(qian)甲基(ji)糠(kang)醛，用乙(yi)酸鹽緩沖溶液稀釋成100ug/ml的(de)標準儲備液。

    　2 .3  5—羥甲基糠醛標準工作液配制：
　　將(jiang)上(shang)述標準儲備液再用乙酸鹽緩(huan)沖溶液配(pei)制成濃度為10ug/ml標準工作液。

    　3 儀器
    　美(mei)國戴安(an)公(gong)司生產(chan)ICS300離子色(se)譜，Ultimate3000 varible waveleng detector紫外檢測器。旋轉蒸發儀(yi)、一次性濾膜0.45um 、1ml—5ml、5ml—10ml加樣槍，色(se)譜柱Diamonsil5uc18　250×4.6mm，美(mei)國密理博公(gong)司生產(chan)的Direct—Q3超純水機。

    　4 色譜條件
    　ICS300離子色譜、紫外檢測器、5uc18  250×4.6mm色譜柱。
    　流動相: 乙腈：水=10：90（v/v）；
    　流速： 1.0ml/min；
    　柱溫：35℃；
    　檢測波長： 276nm；
    　進樣體積： 10μl；
    　保留時間：羥甲基糠醛5.2min。
   ; 　上述操作參數(shu)可根據(ju)儀器情況對給定的參數(shu)做適當的調(diao)整，以(yi)期獲得最(zui)佳效果。

    　5 色譜測定
    　準(zhun)確(que)注射10uL樣液于(yu)離子色(se)譜儀(yi)中，進(jin)(jin)行分析(xi)，響應值均(jun)在儀(yi)器檢測的(de)線性范圍內。對標(biao)準(zhun)工作液和樣液等(deng)體積參(can)插進(jin)(jin)樣測定(ding)，以外標(biao)法(fa)定(ding)量。在色(se)譜條件下，5—羥甲基糠醛(quan)保留時間5. 2分鐘左右。

    　從(cong)上述分(fen)析情況來看，果汁(zhi)中(zhong)5—羥甲基(ji)糠醛(quan)的(de)(de)含量(liang)很低。主要是(shi)要在(zai)果汁(zhi)的(de)(de)壓榨工(gong)藝過程中(zhong)，在(zai)高溫(wen)或(huo)弱酸條件(jian)下(xia)脫水等工(gong)藝條件(jian)及(ji)衛生條件(jian)的(de)(de)嚴格控制下(xia)，最大(da)程度上降低5—羥甲基(ji)糠醛(quan)成分(fen)的(de)(de)產生。